hsa_circRNA_092488 Exacerbates the Progression of Deep Vein Thrombosis Through the NLRP3/NF-κB Signaling Pathway
Jian Wang1, Binghui Du21The First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University, Department of Geriatric Medicine, Jinzhou, P.R. China2The First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University, Department of Vascular Surgery, Jinzhou, P.R. China
Objective: Deep vein thrombosis (DVT) is a vascular disorder with an incidence rate of about 0.1%. Endothelial progenitor cells (EPCs) are precursor cells of endothelial cells and contribute to vascular repair and regeneration. Circular RNA (circRNA) has become a new focus of research as circRNAs are involved in various biological processes including the progression of DVT. This study explored the upregulation of hsa_circRNA_092488 in DVT patients.
Materials and Methods: The expression of hsa_circRNA_092488 was evaluated in venous blood samples obtained from DVT patients (n=42) and healthy controls (n=42). Gain- and loss-of-function studies of hsa_circRNA_092488 were carried out. The expression levels of related RNAs and proteins were examined by quantitative real-time reverse-transcription polymerase chain reaction, western blotting and immunofluorescence assays. The proliferation, migration, cell cycle progression, and apoptosis of transfected cells were measured by CCK-8 assay, transwell assay, and flow cytometry. The association of hsa_circRNA_092488 and NOD-like receptor protein 3 (NLRP3) in EPCs was revealed using RNA pull-down analysis. Furthermore, the stability of NLRP3 mRNA was examined in transfected EPCs.
Results: Upregulation of hsa_circRNA_092488 was detected in blood samples from DVT patients and it had the ability to suppress the proliferation and migration of EPCs, induce cell cycle arrest from the S to the G0/G1 phase, and trigger cellular apoptosis. Furthermore, NLRP3 was identified as the potential downstream target molecule of hsa_circRNA_092488 and it could exert its regulatory functions by activating the NLRP3/nuclear factor (NF)-κB signaling pathway. Overexpression of hsa_circRNA_092488 in cells notably elevated the protein expression of caspase-1, interleukin-1β, P-NF-κB-p65/NF- κB-p65, and P-IκBα/IκBα, while knockdown of hsa_circRNA_092488 significantly reduced the levels of those proteins in EPCs.
Conclusion: hsa_circRNA_092488/NLRP3/NF-κB signaling could be a novel therapeutic candidate for the treatment of DVT.
hsa_circRNA_092488, NLRP3/NF-κB Sinyal Yolu Aracılığı ile Derin Ven Trombozunun İlerlemesini Şiddetlendirir
Jian Wang1, Binghui Du21The First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University, Department of Geriatric Medicine, Jinzhou, P.R. China2The First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University, Department of Vascular Surgery, Jinzhou, P.R. China
Amaç: Derin ven trombozu (DVT), yaklaşık %0,1’lik bir insidans oranına sahip bir vasküler hastalıktır. Endoteliyal progenitor hücreler (EPC), endoteliyal hücrelerin öncü hücreleridir ve vasküler onarım ve rejenerasyona katkıda bulunurlar. Dairesel RNA (circRNA), DVT’nin ilerlemesi de dahil olmak üzere çeşitli biyolojik süreçlerde yer alması nedeniyle yeni bir araştırma odağı haline gelmiştir. Bu çalışmada, DVT hastalarında hsa_circRNA_092488’in yukarı düzenlenmesi araştırıldı.
Gereç ve Yöntem: hsa_circRNA_092488 ekspresyonu DVT hastalarından (n=42) ve sağlıklı kontrollerden (n=42) alınan venöz kan örneklerinde değerlendirildi. hsa_circRNA_092488’in fonksiyon kazanımı ve kaybı çalışmaları yapıldı. İlgili RNA ve proteinlerin ekspresyon düzeyleri kantitatif gerçek zamanlı ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu, western blotting ve immünofloresan analizleri ile incelendi. Transfekte hücrelerin proliferasyonu, göçü, hücre döngüsü ilerlemesi ve apoptozu CCK-8 analizi, transwell analizi ve akış sitometrisi ile ölçüldü. hsa_circRNA_092488 ve NOD benzeri reseptör protein 3’ün (NLRP3) EPC’lerdeki ilişkisi RNA çekim analizi kullanılarak ortaya kondu. Ayrıca, NLRP3 mRNA’nın stabilitesi transfekte EPC’lerde incelendi.
Bulgular: DVT hastalarının kan örneklerinde hsa_circRNA_092488’in yukarı yönlü düzenlenmesi tespit edildi ve bu proteinin EPC’lerin çoğalmasını ve göçünü baskılama, hücre döngüsünün S’den G0/G1 fazına kadar durmasını sağlama ve hücresel apoptozu tetikleme yeteneği olduğu görüldü. Ayrıca, NLRP3, hsa_circRNA_092488’in potansiyel alt akış hedef molekülü olduğu ve düzenleyici işlevlerini NLRP3/nükleer faktör (NF)-κB sinyal yolunu aktive ederek uygulayabileceği tanımlandı. Hücrelerde hsa_circRNA_092488’in aşırı ekspresyonu, kaspaz-1, interlökin-1β, P-NF-κB-p65/NF-κB-p65 ve P-IκBα/IκBα’nın protein ekspresyonunu belirgin şekilde yükseltirken, hsa_circRNA_092488’in baskılanması, bu proteinlerin EPC’lerdeki seviyelerini önemli ölçüde azalttı.
Sonuç: hsa_circRNA_092488/NLRP3/NF-κB sinyal iletimi DVT tedavisinde yeni bir tedavi adayı olabilir.
Manuscript Language: English
Copyright © 2025 Turkish Journal of Hematology