Circulating CD133+/–CD34– Have Increased c-MYC Expression in Myeloproliferative Neoplasmsİldeniz Uslu Bıçak1, Berkay Tokcan1, Akif Selim Yavuz2, Selçuk Sözer Tokdemir31İstanbul University Aziz Sancar Institute of Experimental Medicine, Department of Genetics, İstanbul, Türkiye; İstanbul University, Institute of Health Sciences, İstanbul, Türkiye
2İstanbul University Faculty of Medicine, Department of Internal Medicine, Division of Hematology, İstanbul, Türkiye
3İstanbul University Aziz Sancar Institute of Experimental Medicine, Department of Genetics, İstanbul, Türkiye
Objective: Myeloproliferative neoplasms (MPNs) are hematopoietic stem cell (HSC)-originated diseases with clonal myeloproliferation. The constitutive activation of the JAK/STAT pathway is frequently detected in patients with Philadelphia chromosome-negative (Ph–) MPNs with an acquired JAK2V617F mutation. The c-MYC proto-oncogene is associated with malignant growth and cellular transformation, and JAK2V617F was previously shown to induce constitutive expression of c-MYC. This study examines the expressional profile of c-MYC in Ph– MPNs with JAK2V617F and highlights its hierarchical level of activation in circulating hematopoietic stem/progenitor cell (HSPC) subgroups.
Materials and Methods: Mononuclear cells (MNCs) of Ph– MPNs were fluorochrome-labeled in situ with wild-type (wt) JAK2 or JAK2V617F mRNA gold nanoparticle technology and sorted simultaneously. Isolated populations of JAK2wt or JAK2V617F were evaluated for their c-MYC expressions. The MNCs of 14 Ph– MPNs were further isolated for the study of HSPC subgroups regarding their CD34 and CD133 expressions, evaluated for the presence of JAK2V617F, and compared to cord blood (CB) counterparts for the expression of c-MYC.
Results: The mRNA-labeled gold nanoparticle-treated MNCs were determined to have the highest ratio of c-MYC relative fold-change expression in the biallelic JAK2V617F compartment compared to JAK2wt. The relative c-MYC expression in MNCs of MPNs was significantly increased compared to CB (p=0.01). The circulating HSPCs of CD133+/–CD34− MPNs had statistically significantly elevated c-MYC expression compared to CB.
Conclusion: This is the first study of circulating CD133+/–CD34− cells in Ph– MPNs and it has revealed elevated c-MYC expression levels in HSCs/endothelial progenitor cells (HSCs/EPCs) and EPCs. Furthermore, the steady increase in the expression of c-MYC within MNCs carrying no mutations and monoallelic or biallelic JAK2V617F transcripts was notable. The presence of JAK2V617F with respect to c-MYC expression in the circulating HSCs/EPCs and EPCs of MPNs might provide some evidence for the initiation of JAK2V617F and propagation of disease. Further studies are needed to clarify the implications of increased c-MYC expression in such populations.
Keywords: Myeloproliferative neoplasms, JAK2V617F, Hematopoietic stem cells, c-MYC, CD133, CD34, Gold-nanoflare, Endothelial progenitor cell
Myeloproliferatif Neoplazilerde Dolaşımdaki CD133+/- CD34- Progenitörler Artmış c-MYC İfadelerine Sahiptirİldeniz Uslu Bıçak1, Berkay Tokcan1, Akif Selim Yavuz2, Selçuk Sözer Tokdemir31İstanbul University Aziz Sancar Institute of Experimental Medicine, Department of Genetics, İstanbul, Türkiye; İstanbul University, Institute of Health Sciences, İstanbul, Türkiye
2İstanbul University Faculty of Medicine, Department of Internal Medicine, Division of Hematology, İstanbul, Türkiye
3İstanbul University Aziz Sancar Institute of Experimental Medicine, Department of Genetics, İstanbul, Türkiye
Amaç: Myeloproliferatif neoplazmalar (MPN), klonal myeloproliferasyon gösteren hematopoietik kök hücre (HKH) kaynaklı hastalıklardır. Philadelphia kromozom negatif (Ph–) MPN hastalarında kazanılmış JAK2V617F mutasyonuna bağlı daimi JAK/STAT yolağı aktivasyonu sıklıkla saptanır. Proto-onkogen, c-MYC, malign büyüme ve hücresel transformasyon ile ilişkilidir ve daha önce JAK2V617F’nin, c-MYC’nin daimi anlatımını indüklediği gösterilmiştir. Bu çalışmada, JAK2V617F taşıyan Ph- MPN’lerde c-MYC anlatım profili incelenmiş ve dolaşımdaki hematopoietik kök/progenitör hücre (HKPH) alt gruplarında aktivasyonun hiyerarşik seviyesi araştırılmıştır.
Gereç ve Yöntem: Mononükleer hücreler (MNH) mRNA-altın nanoparçacık teknolojisi ile in-situ yabanil-tip (yt) JAK2 veya JAK2V617F florokromu ile etiketlendi ve izole edildi. JAK2yt veya JAK2V617F transkriptlerinin izole edilmiş popülasyonları, ilgili c-MYC ifadeleri açısından değerlendirildi. On dört MPN örneğinin MNH’leri, CD34 ve CD133 anlatımları kullanılarak dolaşımdaki herbir HKPH alt grubu için izole edildi, JAK2V617F durumu değerlendirildi ve karşılık gelen kordon kanı (KK) altgrubu ile c-MYC anlatımı karşılaştırıldı.
Bulgular: mRNA etiketli altın nanopartikül ile işaretlenmiş MNH’ler, JAK2yt’ye kıyasla bialelik-JAK2V617F bölmesinde en yüksek c-MYC nispi kat değişim ifadesi oranına sahip olduğu belirlendi. MPN MNH’lerindeki göreceli c-MYC anlatımı, KK’ye kıyasla anlamlı bir artış gösterdi (p=0,01). Dolaşan HKPH, CD133+/–CD34–, MPN’de KK’ye kıyasla istatistiksel anlamlı göreceli artmış c-MYC anlatımı gösterdi.
Sonuç: Bu çalışma, Ph- MPN’lerde, dolaşan CD133+/–CD34– ile ilgili ilk çalışmadır. HKH/endotel progenitör hücreler (HKH/EPH) ve EPH’de yüksek c-MYC anlatım seviyesini ortaya koymaktadır. Ayrıca, mutasyon taşımayan, monoalelik veya bialelik-JAK2V617F transkriptleri olan MNH’lerde c-MYC ifadesinde görülen artış önemlidir. MPN’de dolaşımdaki HKH/EPH ve EPH’de c-MYC ifadesine göre JAK2V617F varlığı, JAK2V617F’nin oluşması ve hastalığın yayılması için bazı bilgiler sağlayabilir. Bu tür popülasyonlarda artan c-MYC ifadesinin anlaşılabilmesi için ileri çalışmalar gereklidir.
Anahtar Kelimeler: Myeloproliferatif neoplazmalar, JAK2V617F, Hematopoietik kök hücreler, c-MYC, CD133, CD34, Altın nanoflare, Endotel progenitör hücre
İldeniz Uslu Bıçak, Berkay Tokcan, Akif Selim Yavuz, Selçuk Sözer Tokdemir. Circulating CD133+/–CD34– Have Increased c-MYC Expression in Myeloproliferative Neoplasms. Turk J Hematol. 2023; 40(1): 28-36
Corresponding Author: Selçuk Sözer Tokdemir, Türkiye |
|